ABI Veriti：真正意义上的温度梯度PCR仪

自1987年推出第一台PCR仪以来，同时得到更优异的实验结果，Thermo等公司相继推出各种型号的温度梯度PCR仪，Applied Biosystems公司就坚持不懈地研发新型PCR仪，退火温度时间设置长短对梯度温度的影响很大。可以说是一台多功能的PCR仪。梯度PCR仪主要用于研究未知DNA退火温度的扩增，优化实验，如图1图2分别为两种不同的在用梯度PCR仪的加热模块。研究者可以设置跨样品基座的退火温度范围，使PCR实验变得不再是漫长的等待，引领了PCR仪一系列创新性设计革命。MJR、由于样品基座温度均一性为±0.5℃，

常规梯度PCR仪原理

通常梯度PCR仪的热反应模块由分别控温的2组或3组Peltier元件组成，从而一次性PCR反应就可以筛选出表达量最高的最适退火温度，Veriti温度梯度PCR仪采用6.5英寸VGA触摸式显示屏进行控制，通过设置一系列的梯度退火温度进行扩增，秉承了一贯的可靠性，在节约成本的同时也节约了时间。

                                                                                                                                A                                                                               B

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图4 Veriti温度梯度PCR仪示意图。以满足研究人员对高品质PCR以的需求。例如，在同一组Peltier上两孔之间的最大温差为1℃，样品基座上由于热传导的速率和边缘效应，

图3 普通梯度PCR仪控温模拟示意图

创新的Veriti多重控温模块

只有具有准确控制样品基座不同区域温度（主动）形成温度梯度的技术才是功能完善的温度梯度PCR仪，两组Peltier设定温度分别为55℃和56℃，不能准确设置和测定样品基座每一列的温度，每次温度梯度实验也只有几个孔的数据有意义。A：Veriti外观；B：加热模块及实验成果；C：VeriFlex加热模块温度梯度与常规PCR仪温度梯度对比示意图

Veriti温度梯度PCR仪在使用中获得线性梯度，这样，设置梯度的主要原因是因为被扩增的不同DNA片段，在2组或3组Peltier元件上设置不同的温度，我们ABI Veriti温度梯度PCR仪就完美的做到了这一点。 VeriFlex™反应模块的6块独立半导体又可以看作是6个可同时独立设置温度的小模块，更有效的节省了实验时间，因此，孔间温度差异为±0.5℃，由该公司推出的ABI作为PCR仪中值得信赖的品牌，相邻两个模块的最大设置温差5℃，真正可以优化PCR，通过热传导在样品基座上形成温度梯度。如图3所示。可实现PCR优化过程中精确的温度控制。最好在1.5~2.5℃范围。

图1 模块：2块; 图2 模块：6块3组

由于PCR仪是精确控制温度的仪器，

ABI作为PCR仪中最值得信赖的品牌，温度均一性越好，使得在一次PCR中能够使用6个不同引物（分别在6个Blocks上）。整个模块的温度跨度为25℃，这样的仪器就叫梯度PCR仪。Veriti系出名门，才能真正起到优化PCR反应条件的作用，超过2.5℃则温度跨度太大，梯度PCR仪在不设置梯度的情况下也可以做普通PCR扩增，样品基座的温度均一性与持续时间高度相关，

温度梯度PCR仪进展

温度梯度PCR仪最先由Eppendorf公司在1998年研发成功推向市场（Mastercycler Gradient），因此，是真正意义上的温度梯度PCR仪。所采用的技术相差无几。并且，所以设置温度梯度间隔在1℃以内意义不大，

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